Визначення групи крові цоликлонами: алгоритм

Все в організмі людини обумовлено виробленням різних речовин. Не винятком є і група крові, тип якої залежить від антигенного складу еритроцитів. Сучасна медицина швидко розвивається, та визначення групи крові вже давно не в новинку. Існує безліч методів її визначення. Одним з найбільш поширених є визначення групи крові цоликлонами.

Що це таке?

Цоликлоном називають спеціальне антитіло, що реагує з антигенами, розташованими на поверхні мембран еритроцитів. Для їх одержання використовують методи генної інженерії - спочатку отримують спеціальні бактерії, які вводять в організм мишей. Після імунізації організму миші отримують її асцитную рідина, з якої згодом і виділяють необхідні антитіла. Вони являють собою імуноглобуліни класу М. Завдяки особливій технології виготовлення, цоликлони безпечні для людини в епідеміологічному плані. Речовина випускається у вигляді водно-сольового розчину, який додають до наявними зразками крові. Для кожної групи антигенів є власний розчин цоликлона - анти-А цоликлон має рожеве забарвлення, анти-В - блакитну, а цоликлон анти-D безбарвний.




Свою назву препарати отримали від назви місця, де вони були створені Центральний ордена Леніна інститут переливання крові в Москві.

Методика визначення

Визначення групи крові цоликлонами може проводитися в нативної крові з додаванням консерванту або без нього, а також при дослідженні капілярної крові, взятої з пальця. Безпосередньо визначення групи проводиться на спеціальній пластині або планшеті. В першу чергу, на планшет наноситься крапля розчину цоликлона під відповідною позначкою. Поруч з розчином цоликлона наноситься крапля досліджуваної крові, і вони змішуються між собою. Визначення групи крові цоликлонами проводиться при рівномірному погойдуванні пластини з боку в бік. Візуально спостерігається аглютинація еритроцитів (злипання їх між собою). Якщо результат негативний, аглютинації не відбувається. Процедура обов'язково проводиться при дотриманні певного температурного режиму - від 15 до 25 градусів тепла за нормальної освітленості. Перед проведенням процедури слід переконатися, що термін придатності цоликлонов не минув. У деяких установах з метою контролю за препаратами обов'язково слід зафіксувати час відкриття засобу та термін його придатності. Рекомендується документально відобразити термін придатності реагенту, якщо проводиться визначення групи крові цоликлонами. Фото використовуваних флаконів роблять рідко, проте подібна фіксація також можлива.

Інтерпретація результатів

Після проведення тесту вже можна дізнатися, яка ж група крові у пацієнта. Які ж результати дослідження, якщо проводилося визначення групи крові цоликлонами? Таблиця зіставлення цоликлона і групи крові дозволяє розібратися в отриманих результатах.

цоликлон



1. I(Rh+)



2. I(Rh-)



3. II(Rh+)



4. II(Rh-)



5. III(Rh+)



6. III(Rh-)



7. IV(Rh+)



8. IV(Rh-)



Анти-А











+



+











+



+



Анти-В



















+



+



+



+



Анти-D



+







+







+







+





Як видно з таблиці, якщо аглютинація відбулася в комірці пластини під номером 3 або 4 значить, кров другої групи (аглютинація відбулася за рахунок взаємодії антигену А, розташованого на мембрані еритроцита, і спеціального антитіла, присутнього в розчині анти-А-цоликлона). Відповідно, якщо аглютинація спостерігається в комірці номер 5 або 6 то і група крові - третя. Якщо аглютинації не відбулося ні в одному зазначеному секторі, отже, досліджувана кров не має антигенів, на що напрошується висновок, що група крові - перша. Можливо, що аглютинація відбувається у всіх лунках. Зазвичай, це говорить про неякісне препараті або порушенні правил проведення дослідження.

Для чого проводиться визначення групи крові цоликлонами?

В даний час цоликлони використовуються переважно для визначення групи крові і резус-фактора. Дослідження може проводитися як планово, за призначенням дільничного лікаря-терапевта, так і за екстреними показаннями, коли потрібне переливання крові (в ході операції сталася масивна крововтрата або пацієнт був доставлений з великою травмою і масивним кровотечею). У поліклініці визначення групи проводиться переважно за рахунок використання сироваток. Група крові за цоликлонам визначається найчастіше в стаціонарі або спеціалізованих лабораторіях. До використання цоликлонов вдаються, як правило, при неможливості використання сироваток. Швидкість отримання результатів трохи швидше, ніж при дослідженні стандартними сироватками, що робить методику більш універсальною. Багато лабораторії прагнуть перейти на використання даного методу.

Препарати цоликлонов

Які є різновиди цоликлональних препаратів? Виділяють эритротест-цоликлон анти-D (є три різновиди - супер, що викликає пряму аглютинацію, просто анти-D-цоликлон, при додаванні якого розвивається непряма аглютинація, і анти-D-мікс препарат, що має у своєму складі компоненти перших двох). Вони дозволяють не тільки визначити групу крові цоликлонами, але і виявити резус-належність. Інші розчини відрізняються тільки за назвою, так як вхідні в них антитіла - імуноглобуліни класів М і G дозволяють тільки типувати кров за стандартним, АВ0 антигенів. Відмінність між ними полягає лише в механізмі злипання еритроцитів (пряма чи непряма аглютинація). Кожен з даних препаратів має термін придатності та особливості використання. Однак найбільше поширення в клінічній лабораторній діагностиці отримали тільки три препарати, зазначені вище (анти-А, анти-В, анти-D).

Неправильне трактування результатів

Іноді можливе отримання неправдивих, недостовірних результатів. Наприклад, аглютинація відбулася у всіх комірках планшетки чи при додаванні крові до препарату, наприклад, змінився їх колір. Щоб запобігти подібні результати, якщо проводиться визначення групи крові цоликлонами, алгоритм процедури передбачає деякі правила. В першу чергу слід звернути увагу на термін придатності цоликлонов. Реагенти з вичерпаним терміном обігу використовувати неприпустимо. Обов'язково слід дотримуватися і умови проведення процедури. У приміщенні повинно бути обладнано робоче місце з достатнім освітленням і температурним режимом. Якщо в інструкції до препарату описана і необхідна вологість у приміщенні, необхідно враховувати і її. Важливим є і чистота робочої планшетки, забруднення якої часто призводить до помилок у дослідженні та отримання неправильних результатів.

Де можна провести дослідження?

Визначення групи крові цоликлонами одержує все більше поширення. Якщо раніше ця процедура проводилася тільки в спеціалізованих стаціонарах (наприклад, суто у відділеннях хірургії та гематології), то зараз ця процедура доступна практично в будь обладнаній лабораторії. Дана методика починає поширюватися і в поліклінічній мережі для експрес-визначення групи крові і якнайшвидшого виставлення діагнозу пацієнта. Багато центри приватної медицини та косметології пропонують проведення даної послуги на платній основі. Безкоштовно процедура, як вже було сказано, проводиться при наявності направлення терапевта. Якщо немає можливості звернутися в поліклініку, то як визначити групу крові за цоликлонам? При наявності вдома спеціальної планшетки і набору препаратів, дослідження можна проводити і самостійно, пам'ятаючи, однак, про необхідність дотримання умов процедури і особливо - стерильності.